Enero 2002

 

REQUISITOS MINIMOS EXIGIDOS POR LOS SERVICIOS DE SEMEN

CERTIFICADO PARA EL CONTROL DE ENFERMEDADES EN SEMEN

PRODUCIDO PARA INSEMINACION ARTIFICIAL

 

 

El Manual de los Servicios de Semen Certificado (CSS) sobre los “requerimientos mínimos para el control de enfermedades en semen producido para inseminación artificial” provee una guía de los requerimientos mínimos para el monitoreo de salud y la vigilancia de enfermedades en toros antes de su entrada, durante el período de aislamiento y a lo largo de su residencia en el centro de Inseminación Artificial (IA). Esta es una guía para aquellas enfermedades que presentan el riesgo de ser transmitidas por el semen durante la inseminación artificial. Mas aún, delimita los procedimientos sanitarios correctos e incluye los requerimientos para la adición apropiada de antibióticos tanto al semen como al diluyente para el control de microorganismos específicos. El objetivo de este reglamento es el de proteger la salud de los sementales donantes y del hato en donde se va a utilizar el semen.

 

CONDICIONES SANITARIAS GENERALES

 

1.                  El equipo para la colección de semen que esté en contacto con el toro o con sus secreciones o excreciones deberá ser desinfectado minuciosamente luego de cada uso o se deberá asignar un equipo individual a cada animal.

 

2.         El colector deberá estar minuciosamente aseado y deberá utilizar guantes desechables para cada toro para asegurar que sus manos no sirvan como medio de transmisión de algún material infeccioso o contagioso de un toro a otro.

 

3.         El laboratorio utilizado para procesar el semen deberá estar aislado completamente del sitio de estabulación de los toros y del sitio de colección del semen, y construido para brindar un manejo y almacenamiento higiénico del semen.

 

4.         Las pruebas sanitarias a ser conducidas se harán de manera consistente con las normas descritas en los “Procedimientos de Diagnósticos Uniformes para la Calificación de Toros para la Producción de Semen” descritos por la Asociación Americana de Veterinarios de Laboratorios de Diagnóstico (AAVLD) y otros procedimientos reconocidos como equivalentes a los procedimientos publicados por la AAVLD (http://www.aavld.org/).

 

5.         Debe prestarse atención a los termos de nitrógeno líquido que regresan de países extranjeros no declarados libres de Fiebre Aftosa por el USDA, para determinar si han sido desinfectados en el puerto de entrada. Si han sido debidamente desinfectados, vendrán acompañados de un tiquete que lo indique. Si no se ha hecho la desinfección, el Médico Veterinario de USDA/AHPIS del estado deberá ser notificado y la acción apropiada deberá ser realizada inmediatamente para tener los termos debidamente desinfectados.

 

 

ANIMÁLES DE MONTA

 

Los animales para monta (señuelos) utilizados durante la colección de semen deberán ser sometidos al mismo régimen de pruebas periódicas que los toros para la producción de semen y deben de ser mantenidos continuamente en condiciones sanitarias iguales a las de los toros que cumplen con los requisitos de CSS. Los animales de monta no serán intercambiados entre la población residente y los animales en el área de aislamiento de pre-ingreso.  Las áreas de contacto del pene erecto o de las secreciones genitales con la piel del señuelo deberán ser desinfectadas en forma efectiva y minuciosa entre toros sucesivos.

 

PRE-INGRESO AL AISLAMIENTO

 

Los toros o montas que van a ingresar a un centro de IA aprobado por el CSS deberán de estar sanos y libres de enfermedades infecto-contagiosas y no serán originarios de un rebaño cuarentenado. Subsiguiente a las pruebas de pre-ingreso descritas más adelante, ni los toros ni las montas serán usadas en servicio natural y permanecerán aislados de otros bovinos.  Se entiende por aislamiento la falta de contacto directo o a través de alambradas con otros animales.

Las siguientes pruebas diagnósticas y el examen pre-ingreso deberán ser completados para cada toro o monta antes del comienzo del período de aislamiento. El período de aislamiento no comenzará hasta que hayan sido completadas las pruebas de pre-ingreso y sus resultados negativos sean conocidos.

 

En el caso de que sea necesario realizar las pruebas de pre-ingreso en el Centro de IA, los toros y las montas deberán ser alojados en un edificio diferente y separado del aislamiento y de los animales residentes. Todo el equipo utilizado para el manejo de los animales, comida, bebida y artículos para la limpieza serán exclusivos de esta sección y no tendrán contacto alguno ni con los animales en aislamiento ni con los animales residentes.

 

1.         Examen Físico: En los treinta (30) días previos a la entrada al aislamiento, un Médico Veterinario Acreditado debe realizar un examen físico para determinar que el toro no presenta signos clínicos de alguna enfermedad infecto-contagiosa.

 

2.         Tuberculosis: La prueba de tuberculina intradermocaudal deberá ser negativa dentro de los sesenta (60) días previos a la entrada al aislamiento.

 

3.         Brucelosis: En los treinta (30) días previos a la entrada al aislamiento debe realizarse la prueba de Brucella oficial en cada estado y si va a ser trasladado de un estado a otro las pruebas descritas en el reglamento oficial de cada estado.

 

4.         Leptospirosis bovina: En los treinta (30) días previos a la entrada al aislamiento deben realizarse exámenes de sangre contra los serotipos L. pomona, L. hardjo, L. canicola, L. icterohaemorrhagiae y L. grippotyphosa. Cualquier animal que muestre un título significativo deberá ser sujeto a un segundo examen de sangre 2 a 4 semanas después del primer examen.  Animales que muestren títulos bajos estables (negativos a una dilución 1: 400) en los dos exámenes, pueden ser considerados como satisfactorios para entrar a las unidades de aislamiento del Centro.

 

5.         Diarrea viral bovina (DVB): En los treinta (30) días previos a la entrada al aislamiento debe realizarse el examen de sangre o suero con resultado negativo para la DVB. La prueba será de aislamiento viral en cultivo celular con tinción inmunofluorescente, o inmunoperoxidasa, o captura de antígeno (ELISA).

 

 

AISLAMIENTO

 

Cada toro deberá mantenerse en aislamiento a lo largo de todo el período de tiempo necesario para conducir las pruebas que se describen a continuación antes de ser permitida su entrada al lugar donde se encuentran los toros residentes y antes de colectar semen.

 

Como aislamiento se entenderá que el toro se mantendrá en un lugar efectivamente separado de los toros residentes, de animales de señuelo y de todo el equipo utilizado para colección de semen, manejo de los animales, comida, bebida y artículos para la limpieza las cuales no podrán ser usadas por los animales en aislamiento.  Además, el área para colectar el semen del hato en aislamiento deberá estar separado eficazmente del área para toros residentes.

 

1.                   Las siguientes pruebas deberán ser efectuadas a todos los toros y animales de monta.

 

a.         Tuberculosis: Prueba de tuberculina intradermocaudal, con resultado negativo. Esta prueba deberá realizarse por lo menos sesenta (60) días luego de la fecha de la prueba de tuberculina de pre-entrada.

 

            b.         Brucelosis: Una prueba de antígeno ‘buferado’de Brucela, BAPA o tarjeta y una prueba de fijación de complemento (FC) con resultados negativos. Estas pruebas serológicas deben llevarse a cabo no antes de treinta (30) días luego de la fecha de la prueba de pre-entrada para Brucelosis.

 

En caso de presentarse un resultado que no fuera negativo, se recomienda que se realice otra prueba serológica oficial del USDA como la prueba de tarjeta, rivanol, BAPA, PCFIA.  Un resultado negativo en la segunda prueba o en una o más de las pruebas adicionales, permitirá que el toro obtenga una calificación negativa para Brucela, pero la palabra final la tiene el Médico Veterinario Oficial del estado.

 

            c.         Leptospirosis bovina: Pruebas serológicas para los serotipos L. pomona, L. hardjo, L. canicola, L. icterohaemorrhagiae y L. grippotyphosa. Estas pruebas no deberán  ser  realizadas antes de 30 días luego de la fecha de la prueba de Leptospirosis de pre-ingreso.  Se prefiere un resultado negativo.  Sin embargo, si el resultado es positivo a una dilución 1:100 o más alto, el animal se debe someter a otra prueba realizada no menos de 14 días después de la primera.  Los animales negativos a una dilución 1:400 en dos pruebas consecutivas se consideran que tienen un título bajo estabilizado.

 

            d.         Campilobacteriosis: Se debe cultivar y examinar material prepucial para Campylobacter foetus venerealis, y los resultados deben ser negativos.  Como procedimiento alternativo, el material prepucial puede ser examinado utilizando anticuerpos fluorescentes como técnica de monitor. A cualquier prueba positiva se le debe hacer un cultivo de material prepucial y el resultado debe de ser negativo.

 

Los toros pueden someterse al siguiente calendario de pruebas.

 

Edad del toro en el momento de

entrada al aislamiento

Número mínimo de pruebas (intervalos semanales)

Menos de 180 días*

 

1

180 – 364 días

3

12 meses o mayor

6

 

* Siempre y cuando el Veterinario Acreditado pueda certificar que el ternero no ha cohabitado con hembras después de cumplir un mes de edad.

 

e.         Tricomoniasis genital bovina: Una serie de cultivos de material prepucial debe ser negativo. La frecuencia de muestras deberá ser igual al consignado en el numeral 1.d de AISLAMIENTO.

 

            f.         Diarrea viral bovina (DVB): Todos los toros y animales señuelo que entren a centros de Inseminación Artificial aprobados por el CSS, deberán ser examinados para viremia por  infección persistente de DVB con resultados negativos. Todos los toros serán sometidos a un programa de pruebas para detectar infección testicular persistente.

 

Los siguientes métodos y calendarios serán utilizados para viremia por infección persistente. 

 

I.          Prueba de Diagnóstico: El animal deberá ser sujeto a una prueba de aislamiento en cultivo celular bovino seguido por la tinción de la células por inmunofluorescencia o inmunoperoxidasa con resultado negativo.

 

II.          Tipo de Muestra: Para animales menores de 6 meses el aislamiento debe realizarse sobre las células mononucleares de una muestra de sangre completa. Para animales de 6 meses o mayores, el aislamiento puede realizarse en sangre completa o suero.

 

III.         Confirmación de infección persistente: Si se demuestra la presencia de DVB por inmunofluorescencia o por inmunoperoxidasa en cultivo celular, el animal deberá ser aislado de otros animales y probada una segunda vez en no menos de 21 días por inoculación en cultivo celular bovino con un espécimen adecuado (sangre o suero). Si se demuestra la presencia del virus una segunda vez, se considera como diagnóstico de infección persistente y el animal no se considera apto para entrar al hato residente del Centro.

 

IV.        Confirmación que un animal no tiene infección persistente:  Animales a los cuales se les ha aislado o demostrado la presencia de DVB, deben permanecer separados de cualquier otro animal hasta que se pruebe que se encuentra libre de DVB luego de presentar dos pruebas consecutivas de aislamiento negativas realizadas con 10 días de intervalo y sobre el espécimen adecuado.

 

Toros a los que luego de un aislamiento de DVB hayan sido encontrados negativos de infección persistente como se explicó, debe tener semen colectado y procesado 30 días antes y después de la fecha de aislamiento viral, y debe estar sujeto a pruebas de aislamiento de DVB negativas de cada colección antes de su distribución.

 

2.                  Las siguientes pruebas deben ser realizadas a todos los toros antes de que su semen sea distribuido. Sin embargo, si los toros no están en edad de producción de semen al entrar a aislamiento, las pruebas se pueden realizar luego que se complete el período de aislamiento:

 

 Diarrea Viral Bovina (DVB): Uno de los siguientes protocolos ha sido usado para detectar infección testicular persistente.

 

i.    Realizar pruebas de seroneutralización en todos los animales durante el período de aislamiento. Los animales que resultaran positivos serán sometidos a una prueba de aislamiento viral en semen procesado en cultivo celular con tinción inmunofluorescente (FA) o inmunoperoxidasa (IP). Semen procesado es semen en su  dilución final y congelado.

 

“O”

 

ii.    Todos los toros fueron sometidos a una prueba de aislamiento viral en semen procesado en cultivo celular con tinción inmunofluorescente (FA) o inmunoperoxidasa (IP).  Semen procesado es semen en su dilución final y congelado.

 

[Los animales que resultaran positivos serán sometidos al aislamiento viral una vez mas  para confirmar si son infectados persistentes.]

 

Nota: Los animales que sean determinados como de infección testicular persistente para DVB no podrán ser colectados ni serán admisibles en el hato residente.

 

3.                  Todo semen deberá ser tratado con los antibióticos gentamicina, tilosina, linco-espectina como lo describe Shin, et al (2) y Lorton, et al (3). Los procedimientos se describen en el Anexo 1.

HATO RESIDENTE

 

Una vez que el toro haya completado su período de aislamiento descrito anteriormente, puede entrar a ser parte del hato residente donde continuará siendo examinado de acuerdo con la lista siguiente durante todo el tiempo que su semen sea colectado para inseminación artificial.

 

1.                  Se deberán hacer pruebas para las siguientes enfermedades a todos los toros cada 6 meses:

 

a.         Tuberculosis: Prueba intradermocaudal de tuberculina negativa.

 

b.         Brucelosis bovina: Antígeno de Brucela ‘buferado’ BAPA o tarjeta y Fijación de Complemento (FC) con resultados negativos. (Para mayor información consultar el numeral 1.b Brucelosis en AISLAMIENTO

 

c.         Leptospirosis bovina: Pruebas para los serotipos L. pomona, L. hardjo, L. canicola, L. icterohaemorrhagiae y L. grippotyphosa. Si el resultado no es negativo, el toro debe tener un título bajo estabilizado.   Referirse a AISLAMIENTO 1.c Leptospirosis bovina.

 

d.         Tricomoniasis venérea bovina: Un examen microscópico de material prepucial cultivado con resultado negativo.

 

e.         Campilobacteriosis bovina: Cultivos de material prepucial con resultado negativo. Como procedimiento alterno, se puede hacer una prueba de inmunofluorescencia (FA). A toda muestra (FA) positiva durante el monitoreo se le deberá hacer un cultivo de material prepucial, el cual deberá ser negativo.

 

Se le deberá agregar antibióticos a todo el semen procesado como se indica en el numeral 3. de AISLAMIENTO.

 

2.         Todos los toros del hato residente tendrán que mantenerse en aislamiento continuo de otros animales de pezuña hendida que no hayan cumplido todas las pruebas mencionadas con resultados negativos durante el tiempo que se colecta semen para inseminación artificial. Si se permite el contacto de un toro del hato residente con otro animal que no haya cumplido con todas las pruebas, este deberá ser retirado inmediatamente del hato y no se le permitirá su entrada nuevamente hasta que haya cumplido otro período de aislamiento completo y las pruebas anteriores, excepto en el caso que se describirá a continuación.

 

3.                  No se requiere que a un toro retirado temporalmente de la producción de semen se le hagan las pruebas para Tricomoniasis y Campilobacteriosis siempre y cuando se mantenga separado del hato residente. Sin embargo, deberá mantenerse en un hato que cumpla todas las condiciones requeridas para un hato residente. El régimen de muestreo de rutina en un hato residente deberá reanudarse inmediatamente después que vuelva a ser parte del hato residente.

ANTIBIOTICOS Y PROCESAMIENTO DE SEMEN

 

1.                  Se debe añadir antibióticos al semen y al diluyente para brindar un efectivo control microbiológico de:

 

                                    Micoplasma

                                    Ureoplasma

                                    Histophilus somni

                                    Campylobacter foetus subsp. vererealis

 

2.         Un control microbiológico efectivo es aquel en el cual el número de organismos potencialmente presentes bajo condiciones patológicas se reduce a niveles subclínicos (por debajo del umbral de infectividad).

 

3.         Un protocolo aceptable es el tratamiento del semen y del diluyente con los antibióticos gentamicina, tilosina, spectinomicina como lo describe Shin, et al (1) y Lorton, et al (2,3). Los procedimientos se describen en el Anexo 1.

 

4.         Una alternativa aceptable de protocolo debe proveer un control microbiológico efectivo (de los organismos en el numeral 1) basado en evidencia científica, enviada al CSS.

 

 

REFERENCIAS

 

1.         Shin, S.J.; D.H. Lein; V.H. Patten y H.L. Ruhnke, 1988. A New Antibiotic Combination for Frozen Bovine Semen. 1. Control of Mycoplasmas, Ureoplasmas, Campylobacter foetus subsp. venerealis and Haemophilus somnus. Theriogenology. 29:577.

 

2.         Lorton, S.P.; J.J. Sullivan; B. Bean; M. Kaproth; H. Kellgren and C. Marshall, 1988. A New Antibiotic Combination for Frozen Bovine Serum. 2. Evaluation of Seminal Quality. Theriogenology. 29:593.

 

3.         Lorton, S.P.; J.J. Sullivan; B. Bean; M. Kaproth; H. Kellgren and C. Marshall. 1988. A New Antibiotic Combination for Frozen Bovine Serum 3. Evaluation of Fertility. Theriogenology. 29:609.

 

CERTIFIED SEMEN SERVICES

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Columbia, Missouri 65205-1033

(573) 445-4406 or 445-9541

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ANEXO 1

 

PROCEDIMIENTOS/CONDICIONES GTLS PARA ANTIBIOTICOS

 

A.         SOLUCIONES MADRE/ANTIBIÓTICOS

 

            (1)        Antibióticos:

 

a.         Sulfato de Gentamicina: polvo, micronizado, no estéril, U.S.P. (grado veterinario).

                                    100 gramos por botella.

 

                        b.         Tilosina: tylan soluble, producto de Elanco.

                                    100 gramos por botella.

 

                        c.         Linco-espectina: producto de Upjohn.

20 ml por vial, cada ml contiene 500 mg de lincomicina y 100 mg de spectinomicina.

 

NOTA: Antibióticos obtenidos de algunas fuentes no han sido probados y pueden contener agentes nocivos para las células espermáticas. Para fuentes recomendadas contactar al CSS.

 

            (2)        Las soluciones madres de los antibióticos individuales (gentamicina y tilosina) pueden ser preparados y almacenados por separado a 5o C por 8 días o almacenados en congelación en nitrógeno líquido hasta por espacio de 6 meses. El linco-espectina tal y como lo entrega el distribuidor se debe mantener una vez abierto a 5o C.

 

            (3)        Las soluciones madres individuales serán combinadas el día de su uso, y no se deben guardar.

 

            (4)        Los diluyentes se pueden utilizar el día en que se adicionan los antibióticos combinados.

 

B.                 TRATAMIENTO DEL SEMEN

 

(1)        Por cada ml de semen se mezclará cuidadosamente 100ug de tilosina, 500ug de gentamicina y 300/600ug de linco-espectina disuelto en 0.02 ml de agua doble destilada y estéril.

 

NOTA: Todas las concentraciones de antibióticos expresadas aquí son por unidades activas del antibiótico. Los valores potenciales pueden variar entre lotes de antibiótico. Por esta razón, las cantidades de material crudo deberán ser ajustadas para cada lote para poder obtener la concentración adecuada del antibiótico activo.

 

(2)        La adición de estos antibióticos deberá ser programada para permitir el contacto del semen con el antibiótico por un período de 3 a 5 minutos antes de la adición del diluyente.

 

C.        FRACCION DEL DILUYENTE LIBRE DE GLICEROL

 

(1)        Todas las fracciones sin glicerol de cualquiera de los cinco diluyentes aprobados por el CSS serán preparados para contener las siguientes concentraciones de antibióticos antes de ser adicionados al semen:

 

                        Tilosina                        100 ug por ml

                        Gentamicina                500 ug por ml

                        Linco-espectina          300/600 ug por ml

 

(2)        Un volumen de este diluyente (hasta 50% del volumen del volumen final) se adiciona al semen antes de su enfriamiento. Todo semen debe mantenerse en contacto con la fracción de diluyente libre de glicerol por un mínimo de dos horas antes de la adición de la fracción de diluyente con glicerol.


D.        FRACCION DEL DILUYENTE CON GLICEROL

 

(1)        Esta fracción del diluyente puede tener entre 5-10% de la concentración de antibiótico de la Fracción de diluyente libre de glicerol.

 

(2)        La fracción del diluyente con glicerol se debe añadir a la fracción sin glicerol más semen en una proporción de 1 a 10.

 

E.         CONCENTRACION FINAL DE ANTIBIOTICOS

 

Siguiendo las instrucciones anteriores se obtendrá una concentración final en cada ml de semen congelado de 50ug de tilosina, 250ug de gentamicina y 150/300ug de linco-espectina.

 

F.         PROCEDIMENTOS REQUERIDOS DE PROCESAMIENTO

 

Se ha demostrado que el procedimiento de procesamiento, la composición del diluyente y las combinaciones de antibióticos pueden afectar la eficacia del control microbiológico o la fertilidad. Por esto, una desviación de los pasos siguientes puede requerir que la organización conduzca algunas pruebas adicionales de eficacia:

 

(1)        Uso de algún diluyente no aprobada por el CSS.

 

(2)        Contacto menor de 3 minutos entre el antibiótico y el semen.

 

(3)        Enfriamiento del semen y de la fracción libre de glicerol por un tiempo menor de 2 horas a 5o C.

 

(4)        El glicerol viene a ser parte del diluyente luego del enfriamiento a 5o C.

 

G.         DESVIACION DE LOS PROCEDIMIENTOS REQUERIDOS DE PROCESAMIENTO

 

Si se hace algún cambio en el procedimiento como los expuestos en el numeral anterior se deberá:

 

(1)        Enviar una solicitud de excepción dirigida al Director del CSS.

 

(2)        El Director del CSS determinará si el cambio requiere una nueva prueba de eficacia. Estas pruebas se pueden realizar en un Laboratorio aprobado por el CSS el cual haya demostrado competencia para llevar a cabo estos análisis.

 

(3)        Los resultados obtenidos de estas pruebas se deberán enviar al Director del CSS o a la empresa que los solicitó.

 

(4)        Si los resultados demuestran una eficiencia mayor o igual a la obtenida por Shin (1) se le dará permiso de utilizar el cambio en el procedimiento.

 

(5)        Todos los gastos para estas pruebas serán sufragados por la organización que hace la solicitud.

 

H.         DILUYENTES PROBADOS Y APROBADOS

 

Los siguientes cinco diluyentes han sido probados para medir su eficiencia en el control de organismos microbiológicos. El uso de la combinación de antibióticos en los diluyentes 1 y 3 no tuvo un efecto negativo sobre la motilidad y la fertilidad del semen luego de la descongelación (los diluentes 2, 4 y 5 no fueron evaluados). Otros diluyentes podrán ser aprobados por el Director del CSS siguiendo los pasos en la sección G. En la preparación del diluyente se deberá incluir antibióticos disueltos en agua doble-destilada estéril para obtener los volúmenes finales mostrados en el Anexo 1, sección E. La composición final de cada diluyente es el siguiente:

 

(1)        Citrato de yema de huevo

 

                        20% de yema de huevo

                        2.12gm % citrato de sodio deshidratado

                        0.183gm % acido cítrico monohidrato

                        7.0% glicerol

 

(2)        20% yema de huevo-tris

 

                        20% yema de huevo

                        2.42gm % tris (hidroximetil aminometano)

                        1.38gm % ácido cítrico monohidrato

                        1.00gm % fructosa

                        7.0% glicerol

 

(3)        Leche entera calentada

 

                        7.0% Glicerol

 

(4)        X-Plus

 

                        X-plus, como viene

                        7.0% glicerol

 

(5)        28% yema de huevo-tris

 

                        28% yema de huevo

                        1.92gm % tris (hidroximetil aminometano)

                        1.10 gm % acido citrico monohidrato

                        1.00 gm% glucosa

                        7.0% glicerol

 

REFERENCIAS

 

(1)        Shin, S.J.; D.H. Lein; V.H. Patten and H.L. Ruhnke. 1988. A New Antibiotic Combination for Frozen Bovine Semen. 1. Control of Mycoplasmas, Ureoplasmas, Campilobacter foetus subsp. venerealis and Haemophilus somnus. Theriogenology 29:577.

ANEXO 2

PROTOCOLO BASICO DE PRUEBAS DEL CSS

 

El Programa Básico de Pruebas Sanitarias se describe en la guía de “Requerimientos Mínimos para el Control de Enfermedades en Semen Producido para Inseminación Artificial”. Estos requerimientos han sido desarrollados por mucho tiempo por la industria de la inseminación artificial para ayudar a asegurar que el semen utilizado para la inseminación artificial no es un vehículo de transmisión para los agentes de enfermedades infecto-contagiosas.

 

A continuación se hace un resumen del Programa de Pruebas del CSS:

 

Ambiente de Pruebas

PRUEBA

PRE-ENTRADA (30 días antes de entrar a aislamiento)

AISLAMIENTO (antes de entrar al hato residente)

HATO RESIDENTE (donde se colecta semen)

Examen físico

Realizado por un Médico Veterinario Acreditado.

 

 

Tuberculosis

Prueba de tuberculina intradermocaudal - negativa.

Prueba de tuberculina intradermocaudal - negativa (60 días después de la prueba de pre-entrada).

Prueba de tuberculina intradermocaudal - negativa (a intervalos de 6 meses).

Brucellosis

Examen oficial del estado en el que reside el toro.

Fijación del Complemento o BAPA o tarjeta por lo menos 30 días después del examen de pre-entrada.

Pruebas de aglutinación de sangre o Bapa o tarjeta y fijación de complemento negativas a intervalos de 6 meses.

Diarrea Viral Bovina

Aislamiento viral sangre o suero negativo o captura de antígeno ELISA

Un aislamiento viral negativo ya sea en sangre (animales menores de 6 meses). en suero.. Una prueba a los toros y animales señuelos antes de entrar al hato residente.

Aislamiento viral negativo en semen procesado antes de la liberación del semen para uso en diseminación.

Aislamiento viral negativo en semen procesado para cualquier donante que haya resultado positivo para DVB SN.

 

Leptospirosis

 

Pruebas de sangre para los cinco serotipos de importancia en EEUU*

Pruebas de sangre para los cinco serotipos de importancia en EEUU* 30 días después de las pruebas de pre-entrada.

Pruebas de sangre de los cinco serotipos de importancia en EEUU* en intervalos de 6 meses.

Campilobacteriosis

 

Serie de cultivos de material prepucial negativos o monitoreo por anticuerpos fluorescentes donde a cualquier positivo se le haga un cultivo. Toros menores de 6 meses-negativos en 1 prueba** . Toros menores de 12 meses-negativos en 3 pruebas semanales. Toros mayores de 12 meses negativos en 6 pruebas semanales.

Cultivos de material prepucial negativos o monitoreo por anticuerpo fluorescente cada 6 meses.

Trichomoniasis

 

Serie de cultivos de microscopia negativa de cultivos de material prepucial . Toros menores de 6 meses-negativos en 1 prueba**. Toros menores de 12 meses - negativos en 3 pruebas. Toros mayores de 12 meses negativos en 6 pruebas semanales.

Una microscopia negativa de cultivo de material prepucial cada 6 meses.

 

*   L pomona, L hardjo, L canicola, L icterohaemorrhagiae, y l. grippotyphosa.

** Siempre y cuando el Veterinario Acreditado pueda certificar que el ternero no ha cohabitado con hembras después de cumplir un mes de edad.

 

 

Tratamiento de antibiótico de todo el semen y el diluyente

 

(1)        Tratamiento del semen: 100ug de tilosina, 500ug de gentamicina y 300/600ug de linco-espectina disuelto en 0.02ml de agua doble-destilada estéril, adicionado y mezclado con cada ml de semen.

 

(2)        Diluyente aprobado por el CSS: Los mismos antibióticos se adicionan al diluyente para que la concentración final sea 50ug de tilosina, 250ug de gentamicina y 150/300ug de linco-espectina en cada mi de semen congelado.